電泳儀的研發(fā)背景與使用技巧
發(fā)布時(shí)間：2018-06-01 閱讀：1219次
電泳儀的應(yīng)用雖廣泛，但是有不少用戶對其了解甚少，以下內(nèi)容主要從電泳儀的研發(fā)背景與使用技巧開始介紹，助大家對其有個(gè)深入的了解！
一、電泳儀的研發(fā)背景
1937年，瑞典生化學(xué)家Tiselius集前人百余年探索電泳現(xiàn)象之大成，了Tiselius電泳儀，在此基礎(chǔ)上建立了研究蛋白質(zhì)的自由界面電泳方法，利用該法次證明人血清是由白蛋白（A）、α、β、γ球蛋白組成，并因此于1948年獲得阿果獎(jiǎng)。隨后電泳技術(shù)的發(fā)展突飛猛進(jìn)，1949年，RicketlsMarrack等人證明人血清蛋白質(zhì)經(jīng)電泳分離可依次分為白蛋白，α1、α2、β、γ球蛋白五個(gè)組分，1957年Reiner對人血清五個(gè)組分蛋白進(jìn)行了定量分析。
但自由界面電泳沒有固定支持介質(zhì)，擴(kuò)散和對流作用較強(qiáng)，影響分離效果，于是在50年代相繼出現(xiàn)了固相支持介質(zhì)電泳。初的支持介質(zhì)是濾紙和醋酸纖維素膜，目前這些介質(zhì)在實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)應(yīng)用較少。在很長一段時(shí)間里，小分子物質(zhì)如氨基酸、多肽、糖等通常用濾紙、纖維素或硅膠薄層平板作為介質(zhì)進(jìn)行電泳分離、分析，但目前一般使用靈敏度高的技術(shù)如液相色譜法(HPLC)等來進(jìn)行分析。而對于復(fù)雜的生物大分子，以濾紙、硅膠或醋酸纖維素膜等作為支持介質(zhì)進(jìn)行電泳，其分離效果并不理想。于是1959年，Raymond和Weintraub,Davis和Ornstein先后利用人工合成凝膠作支持介質(zhì)建立了聚丙烯酰胺凝膠電泳，從而大大提高了電泳的分辨率和分離效果，增強(qiáng)了電泳技術(shù)的發(fā)展、滲透及與其他技術(shù)結(jié)合配套的能力。致使各式各樣的電泳技術(shù)和電泳材料如雨后春筍、競相爭榮，成為當(dāng)代實(shí)驗(yàn)科學(xué)技術(shù)中品種繁多、應(yīng)用廣泛、基礎(chǔ)與技術(shù)皆備的大技術(shù)。
一、電泳儀的使用技巧
1、電泳儀通電進(jìn)入工作狀態(tài)后，禁止人體接觸電、電泳儀電泳物及其它可能帶電部分，也不能到電泳儀電泳槽內(nèi)取放東西，如需要應(yīng)先斷電，以免觸電。同時(shí)要求電泳儀必須有良好接地端，以防漏電。
2、電泳儀通電后，不要臨時(shí)增加或撥除輸出導(dǎo)線插頭，以防短路現(xiàn)象發(fā)生，雖然電泳儀內(nèi)部附設(shè)有保險(xiǎn)絲，但短路現(xiàn)象仍有可能導(dǎo)致電泳儀損壞。
3、由于電泳儀不同介質(zhì)支持物的電阻值不同，電泳儀電泳時(shí)所通過的電流量也不同，其電泳儀泳動速度及泳至終點(diǎn)所需時(shí)間也不同，故電泳儀不同介質(zhì)支持物的電泳不要同時(shí)在同一電泳儀上進(jìn)行。
4、在總電流不超過電泳儀額定電流時(shí)(大電流范圍)，可以多槽關(guān)聯(lián)使用，但要注意不能超載，否則容易影響電泳儀壽命。
5、參照實(shí)驗(yàn)要求選擇相應(yīng)規(guī)格型號的電泳儀，才能確保經(jīng)濟(jì)、耐用、簡單、合理。因?yàn)楦摺⒌蛪弘娪緝x內(nèi)部結(jié)構(gòu)特征不同，由于高壓電泳儀常附加有多項(xiàng)功能，而且高壓電泳儀不能空載運(yùn)行（容易造成人身傷害、內(nèi)部器件損壞），導(dǎo)致操作上難易程度的不同等。因此正確的選購方法是：“根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求的高電壓，確定購買電泳儀的規(guī)格及型號”。
6、某些特殊情況下需檢查電泳儀電泳輸入情況時(shí)，允許在穩(wěn)壓狀態(tài)下空載開機(jī)，但在穩(wěn)流狀態(tài)下必須先接好負(fù)載再開機(jī)，否則電壓表指針將大幅度跳動，容易造成不必要的人為電泳儀損壞。
7、使用過程中發(fā)現(xiàn)電泳儀異常現(xiàn)象，如較大噪音、放電或異常氣味，須立即切斷電泳儀電源，進(jìn)行檢修，以免發(fā)生意外事故。
8、電泳儀是儀器，在操作過程中要嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，但不可避免會出現(xiàn)各種各樣的故障，當(dāng)儀器提示有故障時(shí)，應(yīng)立即處理。
9、如果電泳儀的輸出電壓U達(dá)不到預(yù)置值，應(yīng)先觀察I或P是否已經(jīng)恒定，或者已經(jīng)達(dá)到電泳儀所規(guī)定的大I或P(JY電泳儀均有明確指示燈標(biāo)志)。如果尚未達(dá)到限值，將已經(jīng)恒定I或P的設(shè)置調(diào)大(有必要的話至限值)，才能夠提高電壓輸出。
一、電泳儀的研發(fā)背景
1937年，瑞典生化學(xué)家Tiselius集前人百余年探索電泳現(xiàn)象之大成，了Tiselius電泳儀，在此基礎(chǔ)上建立了研究蛋白質(zhì)的自由界面電泳方法，利用該法次證明人血清是由白蛋白（A）、α、β、γ球蛋白組成，并因此于1948年獲得阿果獎(jiǎng)。隨后電泳技術(shù)的發(fā)展突飛猛進(jìn)，1949年，RicketlsMarrack等人證明人血清蛋白質(zhì)經(jīng)電泳分離可依次分為白蛋白，α1、α2、β、γ球蛋白五個(gè)組分，1957年Reiner對人血清五個(gè)組分蛋白進(jìn)行了定量分析。
但自由界面電泳沒有固定支持介質(zhì)，擴(kuò)散和對流作用較強(qiáng)，影響分離效果，于是在50年代相繼出現(xiàn)了固相支持介質(zhì)電泳。初的支持介質(zhì)是濾紙和醋酸纖維素膜，目前這些介質(zhì)在實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)應(yīng)用較少。在很長一段時(shí)間里，小分子物質(zhì)如氨基酸、多肽、糖等通常用濾紙、纖維素或硅膠薄層平板作為介質(zhì)進(jìn)行電泳分離、分析，但目前一般使用靈敏度高的技術(shù)如液相色譜法(HPLC)等來進(jìn)行分析。而對于復(fù)雜的生物大分子，以濾紙、硅膠或醋酸纖維素膜等作為支持介質(zhì)進(jìn)行電泳，其分離效果并不理想。于是1959年，Raymond和Weintraub,Davis和Ornstein先后利用人工合成凝膠作支持介質(zhì)建立了聚丙烯酰胺凝膠電泳，從而大大提高了電泳的分辨率和分離效果，增強(qiáng)了電泳技術(shù)的發(fā)展、滲透及與其他技術(shù)結(jié)合配套的能力。致使各式各樣的電泳技術(shù)和電泳材料如雨后春筍、競相爭榮，成為當(dāng)代實(shí)驗(yàn)科學(xué)技術(shù)中品種繁多、應(yīng)用廣泛、基礎(chǔ)與技術(shù)皆備的大技術(shù)。
一、電泳儀的使用技巧
1、電泳儀通電進(jìn)入工作狀態(tài)后，禁止人體接觸電、電泳儀電泳物及其它可能帶電部分，也不能到電泳儀電泳槽內(nèi)取放東西，如需要應(yīng)先斷電，以免觸電。同時(shí)要求電泳儀必須有良好接地端，以防漏電。
2、電泳儀通電后，不要臨時(shí)增加或撥除輸出導(dǎo)線插頭，以防短路現(xiàn)象發(fā)生，雖然電泳儀內(nèi)部附設(shè)有保險(xiǎn)絲，但短路現(xiàn)象仍有可能導(dǎo)致電泳儀損壞。
3、由于電泳儀不同介質(zhì)支持物的電阻值不同，電泳儀電泳時(shí)所通過的電流量也不同，其電泳儀泳動速度及泳至終點(diǎn)所需時(shí)間也不同，故電泳儀不同介質(zhì)支持物的電泳不要同時(shí)在同一電泳儀上進(jìn)行。
4、在總電流不超過電泳儀額定電流時(shí)(大電流范圍)，可以多槽關(guān)聯(lián)使用，但要注意不能超載，否則容易影響電泳儀壽命。
5、參照實(shí)驗(yàn)要求選擇相應(yīng)規(guī)格型號的電泳儀，才能確保經(jīng)濟(jì)、耐用、簡單、合理。因?yàn)楦摺⒌蛪弘娪緝x內(nèi)部結(jié)構(gòu)特征不同，由于高壓電泳儀常附加有多項(xiàng)功能，而且高壓電泳儀不能空載運(yùn)行（容易造成人身傷害、內(nèi)部器件損壞），導(dǎo)致操作上難易程度的不同等。因此正確的選購方法是：“根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求的高電壓，確定購買電泳儀的規(guī)格及型號”。
6、某些特殊情況下需檢查電泳儀電泳輸入情況時(shí)，允許在穩(wěn)壓狀態(tài)下空載開機(jī)，但在穩(wěn)流狀態(tài)下必須先接好負(fù)載再開機(jī)，否則電壓表指針將大幅度跳動，容易造成不必要的人為電泳儀損壞。
7、使用過程中發(fā)現(xiàn)電泳儀異常現(xiàn)象，如較大噪音、放電或異常氣味，須立即切斷電泳儀電源，進(jìn)行檢修，以免發(fā)生意外事故。
8、電泳儀是儀器，在操作過程中要嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，但不可避免會出現(xiàn)各種各樣的故障，當(dāng)儀器提示有故障時(shí)，應(yīng)立即處理。
9、如果電泳儀的輸出電壓U達(dá)不到預(yù)置值，應(yīng)先觀察I或P是否已經(jīng)恒定，或者已經(jīng)達(dá)到電泳儀所規(guī)定的大I或P(JY電泳儀均有明確指示燈標(biāo)志)。如果尚未達(dá)到限值，將已經(jīng)恒定I或P的設(shè)置調(diào)大(有必要的話至限值)，才能夠提高電壓輸出。
